荧光素酶检测专利-双荧光素酶实验可以确定靶向

双荧光素酶实验可以确定靶向作用吗

（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。
（2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。
（3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。
（4） 扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照，提纯备用。
（5） 培养293（或其它目的细胞），并接种于24孔板中，生长10-24小时（80%汇合度）。
（6） 将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。
（7）提取蛋白并用于荧光素酶检测。
（8） 加入底物，测定荧光素酶的活性。
（9） 计算相对荧光强度，并与空载对照比较。 集群智慧云企服，企业服务好帮手！https://www.jiqunzhihui.net/

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荧光素酶为什么可以用来检测犯罪现场残留的血迹
荧光素酶检测时，反应是一个很弱的自发光反应，无需外来光源，需要使用发光检测仪来检测。普通酶标仪检测的是吸光度，检测原理与荧光素酶完全不同，无法检测荧光素酶。
参考：http://www.lumflu.com/A_Info.asp?id=29
荧光素酶报告基因的技术流程是什么？
荧光素酶检测时，反应是一个很弱的自发光反应，无需外来光源，需要使用发光检测仪来检测。普通酶标仪检测的是吸光度，检测原理与荧光素酶完全不同，无法检测荧光素酶。
参考：http://www.lumflu.com/A_Info.asp?id=29
转录因子 预测后怎么做实验让后用荧光素酶实验及em...
荧光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中，荧光的产生是来自于萤光素的氧化，有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷（ATP）。没有荧光素酶的情况下，萤光素与氧气反应的速率非常慢，而钙离子的存在常常可以进一步加速反应（与肌肉收缩的情况相似）。[1]荧光生成反应通常分为以下两步：

萤光素 ATP → 萤光素化腺苷酸（luciferyl adenylate） PPi

萤光素化腺苷酸 O2 → 氧荧光素 AMP 光

这一反应非常节省能量，几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯，只有越10%的能量被转化为光，剩余的能量都变为热能而被浪费。

荧光素或荧光素酶不是特定的分子，而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称，虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。最为人所知的发光生物是萤火虫，而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇（发光类脐菇，Omphalotus olearius）或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中，发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管（abdominal trachea）的管道中输入。一些生物，如叩头虫，含有多种不同的荧光素酶，能够催化同一荧光素底物，而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种，而叩甲总科（包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫）则有更多，因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得最透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫（Photinus pyralis）。